分辨玛瑙的真假可以测硬度，玛瑙的硬度是6.5～7，用它去刻划硬度是6的钢锯条，真玛瑙能留下痕迹，且自身不受损伤的，假玛瑙不能留下痕迹，自身受损。此法属于有损鉴定，需谨慎使用。

分辨玛瑙的真假也可以算密度，玛瑙的相对密度是2.55～2.70，用精密仪器进行测量，计算，真玛瑙的密度在此范围，假玛瑙的密度不在此范围。此法容易出现误差，需多测、多计算几次。

分辨玛瑙的真假还可以用摩擦法，用玛瑙在质硬木板上进行快速摩擦，十几下后，不会和木板一起发热的是真玛瑙，和木板一起发热的是假玛瑙。

分辨玛瑙的真假同时可以观看层纹，真玛瑙颜色混杂，内部有美丽的花纹、层纹，假玛瑙颜色区分明显，也没有花纹、层纹的存在。整块玛瑙可以用这个方法分辨真假，小块玛瑙图案不完整，不适合用这个方法鉴定真假。